تیمار ۶- محیط کشت ۲ میلی­گرم در لیتر TDZ

تیمار ۷- محیط کشت ۵/۰ میلی­گرم در لیتر + TDZ 1/0 میلی­گرم در لیتر NAA

تیمار ۸- محیط کشت ۱ میلی­گرم در لیتر + TDZ 1/0 میلی­گرم در لیتر NAA

تیمار ۹- محیط کشت ۲ میلی­گرم در لیتر + TDZ 1/0 میلی­گرم در لیتر NAA

جدول ۵-۳ غلظت­های مختلف پوترسین در ترکیب با بهترین تیمار مرحله باززایی

تیمار ۱- ۵۰ میلی­گرم در لیتر پوترسین + بهترین تیمار مرحله باززایی

تیمار ۲- ۱۰۰ میلی­گرم در لیتر پوترسین + بهترین تیمار مرحله باززایی

تیمار ۳- ۲۰۰ میلی­گرم در لیتر پوترسین + بهترین تیمار مرحله باززایی

۴-۱۰-۳ شرایط محیطی و نوری تولید شاخساره
کالوس‌ها به­ منظور تولید شاخساره به اتاق رشد در شرایط نوری۲۵۰۰ لوکس و ۱۶ ساعت روشنایی و ۸ ساعت تاریکی انتقال داده شدند. دمای اتاق رشد ۲±۲۵ درجه سانتی ­گراد و رطوبت مناسب برای رشد شاخساره‌ها فراهم شد. بعد از گذشت ۱۰ هفته شاخص‌های تعداد شاخساره و طول شاخساره اندازه گیری شد.

۵-۱۰-۳ انتقال شاخساره به محیط کشت ریشه زایی
شیشه‌های کشت تولید شاخساره به زیر دستگاه لامینار ایر فلو انتقال داده شد و سپس در شرایط کاملا استریل، شاخساره‌های تولیدی توسط پنس به محیط کشت‌های ریشه زایی انتقال داده شدند.
۱۱-۳ بررسی تعیین بهترین محیط کشت ریشه زایی
به منظور ریشه زایی شاخساره­های تولید شده، آزمایشی به صورت طرح کاملا تصادفی با ۵ تیمار و ۳ تکرار (هرتکرار شامل۱۰ شاخساره) انجام گرفت. پس از تهیه محیط های کشت ریشه­زایی، شاخساره های تولید شده در شرایط کشت درون شیشه ­ای در زیر دستگاه لامینار ایر فلو در شرایط کاملا استریل به محیط کشت ریشه­زایی منتقل شدند. سپس شیشه های کشت در دمای ۲±۲۵ درجه سانتی گراد، و شرایط نوری ۱۶ ساعت روشنایی و ۸ ساعت تاریکی نگهداری شدند. پس از ۶ هفته شاخص تعداد ریشه و طول ریشه اندازه گیری شدند.
محیط های مورد استفاده برای ریشه زایی به ترتیب زیر بودند:

تیمار ۱- محیط کشت MS بدون تنظیم کننده رشد (شاهد)

تیمار ۲- محیط کشت MS + 5/0 میلی­گرم در لیترNAA

تیمار ۳- محیط کشت MS + 1 میلی­گرم در لیترNAA

تیمار ۴- محیط کشت MS + 5/0 میلی­گرم در لیتر NAA + 1/0 میلی­گرم در لیتر IBA

تیمار ۵- محیط کشت MS + 1 میلی­گرم در لیتر NAA + 1/0 میلی­گرم در لیتر IBA

۱-۱۱-۳ شرایط محیطی و مدت دوره ریشه زایی
جهت ایجاد و رشد ریشه‌ها، شاخساره‌ها بعد از ۴ هفته تولید ریشه کردند و تبدیل به گیاهچه کامل گشتند، جهت سازگاری به گلدان‌های پلاستیکی انتقال داده شدند.
۲-۱۱-۳ تولید و اندازگیری ریشه‌ها
بعد ۴ هفته از تشکیل ریشه، شاخص‌های تعداد ریشه و طول ریشه اندازگیری شدند.